الخلاصة

    اجريت الدراسة في حقل النباتات الطبية والبيت الحيواني التابع الى كلية الصيدلة / جامعة كربلاء ، بهدف معرفة تأثير التسميد الحيوي Biofertilization ببكتيريا Bacillus subtilis و Pseudomonas fluorescens والاثنان معاً (B. subtilis + Ps. Fluorescens) في الصفات المورفولوجية والفسلجية لنبات البابونج Matricaria chamomile وتأثيرها ايضا في كمية المواد الفعالة للمستخلصات الكحولية لازهار البابونج، بصفتها مواد مانعة لتخثر الدم (Anti-coagulant) داخل الجسم الحي (In vivo) وخارجه (In vitro) ، ومعرفة تأثيراتها في بعض صفات الدم ومعاييره الفسلجية في ذكور الفئران (Sprague dawley) المعاملة بهذه المستخلصات وفصل المركبات بتقنية T.L.C) Thin Layer Chromatography,) من المستخلصات الفينولية الخام لازهار نبات البابونج.

اوضحت نتائج الدراسة ارتفاعا معنويا في معدل عدد الافرع الخضرية اذ بلغت لمعاملة Comtrol ومعاملةps. fluorescons. ومعاملة Ps. ومعاملة B.subtilistps fluoresens (11.9 /نبات ، 17.6/نبات ، 19.6/نبات ، 37.6/نبات) على التوالي. كما لوحظ زيادة في معدل عدد النورات الزهرية عند مقارنتها مع معاملة السيطرة اذ بلغت 14.16 لمعاملة B. و 14.2 لمعاملة Ps. في حين بلغت عند معاملة (B. + Ps.) 22.63 مقارنة مع معاملة السيطرة الذي بلغ 10.11. في حين بلغت اطوال النباتات المعاملة بـ (B. + Ps.) اذ بلغت 44.21 سم و 50.33 سم لمعاملة B. و 55.56 سم لمعاملة Ps. مقارنة مع معاملة السيطرة التي سجلت 35.69 سم. اما بالنسبة لتأثير التسميد الحيوي في الصفات الفسلجية، فقد اثبتت النتائج تفاوت النسب المئوية للزيت الطيار المستخلص من معاملات التسميد الحيوي قيد الدراسة اذ اعطت معاملة (B. + Ps.) اعلى نسبة مئوية للزيت بلغت 25.28% مقارنة مع معاملة C و B. و Ps. والبالغة 8.76 و 11.68 و 12.91% على التوالي. كما سجل ارتفاعا في جاهزية العناصر الكبرى والصغرى(النتروجين N ، الفسفور P ، البوتاسيوم K ، الحديد Fe ، المنغنيز Mn ، النحاس Cu ، الزنك Zn والمغنيسيوم Mg) في اوراق نبات البابونج في المعاملات المدروسة . كما بينت نتائج التحليل الاحصائي تفوق معاملة (B. + Ps.) معنويا في زيادة معدلات قيم الكلوروفيل A و والكلوروفيل B اذ بلغ اعلى معدل لقيمة الكلوروفيل A (4.21) ملغم / 100 غم متفوقة على معاملة السيطرة ومعاملة B. ومعاملة Ps.، اذ بلغت قيمة الكلوروفيل A 1.41 ، 2.19 و 2.35 ملغم / 100 غم من الوزن على التوالي. كما وازدادت قيم الكلوروفيل B في معاملة (B. + Ps.) اذ وصل اقصاه 3.78 ملغم / 100 غم متفوقة على المعاملات C و B. و Ps. والتي بلغت 1.45 ، 2.01 و 2.25 ملغم / 100 غم . بينت نتائج البحث بأن لنوع البكتريا المستخدم في التسميد الحيوي ولكل معاملة تأثيرات واضحة في زيادة صفة الوزن الجاف لازهار نبات البابونج اذ تفوقت معاملة B. + Ps. وبلغت 1.55 غم مقارنة مع المعاملات C و B. و Ps. والتي بلغت 0.031 ، 0.060 و 0.060 غم على التوالي.

                اوضحت نتائج الكشف الاستدلالي (الترسيبي) للمستخلصات الكحولية لازهار نبات البابونج باحتوائه على المركبات الفينولية ، والقلويدية والتربينية اضافة الى الكلايكوسيدات. بلغت قيمة الجرعة القاتلة لنصف الحيوانات المختبرية LD₅₀ للمستخلص الايثانولي لازهار نبات البابونج ولكافة معاملات التسميد الحيوي 9875 ملغم / كغم من وزن الجسم وبطريقة الحقن تحت الجلد . كما ولوحظ ارتفاعا معنويا في زمن النزف وزمن التخثر وزمن البروثرومبين وزمن الثرومبوبلاستين اذ اظهرت معاملة المستخلص الكحولي لازهار النباتات المعاملة B. + Ps. وعند الجرعة 1250 ملغم / كغم زيادة واضحة في زمن النزف وزمن التخثر اللذان بلغا 9.01 و 8.99 دقيقة على التوالي مقارنة مع معاملة السيطرة والتي بلغت معدلاتهما 2.89 و 2.66 دقيقة. كما ولوحظت زيادة معنوية في زمن البروثرومبين والثرومبوبلاستين اذ بلغ معدلهما 23.09 و 43.69 ثانية مقارنة مع معاملة السيطرة البالغة 11.31 و 20.73 ثانية . ادت المعاملة الى تغيرات معنوية في المعايير الوظيفية للدم اذ سببت انخفاضا في معدلات تركيز خضاب الدم عند المقارنة بمعاملة السيطرة ، وكانت معاملة الـ B. الاكثر انخفاضا عند الجرعة 1250 ملغم / كغم اذ بلغت 11.78 غم / ديسيليتر ، كما حصل ارتفاعا في معدل ترسيب كريات الدم الحمراء Erythrocytes Sedimentation Rate (E.S.R) وفي معدل العدد الكلي لخلايا الدم البيضاء ولمستخلص معاملة B. + Ps. عند الجرعة 1250 ملغم / كغم تأثير في هذا الارتفاع ، اذ بلغــت 9023.56، و 8033.11 و 8033 ملم³ / 10³ على التوالي مقارنة مع معاملة السيطرة البالغة 5901.21 و 5901.21 و 5331.50 ملم³ / 10³ على التوالي.

                  من جانب اخر فقد بينت النتائج انخفاضا معنويا في معدلات اعداد كريات الدم الحمراء والصفائح الدموية اذ بلغا 2.99 ×10⁶ كرية / ملم³ و 301.01× 10³صفيحة / ملم³ على التوالي لمستخلص B. + Ps. الكحولي عند مقارنته مع معاملة السيطرة اذ بلغتا 8.23× 10⁶ كرية / ملم³ و 666.15× 10³ صفيحة / ملم³ على التوالي.

                  ان التراكيز العالية (1000 و 1250) ملغم / كغم من مستخلصات أزهار البابونج ولمعاملات التسميد الحيوي بـ B. و Ps. و (B. + Ps.) قد سببت توسعا في الاوعية الدموية واحتقانها مع نزف وتورم الخلايا وتنكس خلوي (Cellular degeneration) مع ارتشاح في الخلايا اللمفاوية في منطقة الاحتقان لكل من اعضاء الكبد ، الكلى ، الطحال ولجميع مستخلصات التسميد الحيوي بالبكتيريا المدروسة وبدرجات متفاوتة . بينت الدراسة ان اقل تركيز مضاد لتخثر الدم لمستخلص (B. + Ps.) بلغ 25 ملغم / سم³ من الدم ولم تتأثر مكونات الدم الاساسية عند معاملة الدم بالمستخلص والتركيز اعلاه وان مستخلص B. + Ps. يعمل عمل الهيبارين (Heparin) وليس كعمل سترات الصوديوم وان مدة الخزن لم تؤثر في الفعالية البايولوجية للمستخلص والمركبات المعزولة منه . كما وتم عزل ثلاثة مركبات من المستخلص الفينولي الخام لازهار نبات البابونج مع تحديد لون و R.F (قيم التحرك النسبي Relative flow) بوساطة العين المجردة والاشعة فوق البنفسجية (U.V) وحضرت منه التراكيز 2.5 و 5 و 7.5 و 10 ملغم / مل واختبرت على الفئران لبعض صفات الدم المدروسة سابقا ، وظهر بأن المركب (2) وبالتركيز 2.5 ملغم / مل يماثل عمل مستخلص B. + Ps. واللذان يعملان عمل الهيبارين كمادة مانعة لتخثر الدم.