الخلاصة

اجريت هذه الدراسة في مختبر الدراسات العليا في كلية التربية للعلوم الصرفة في جامعة كربلاء ضمن سلسلة عزل وتشخيص الفطريات المرافقة للمخطوطات التاريخية في مركز صيانة وترميم المخطوطات ورعاية الباحثين للمدة من 20/11/2018 لغاية 20/ 1/ 2019في العتبة الحسينية المقدسة في مدينة كربلاء . بهدف المحافظة على المخطوطات واستعمال الزنك النانوي والفضة النانوية في السيطرة على الفطريات التي تسبب تلف للمخطوطات ووصفها كمادة تضاف إلى عجينة الترميم .
شخصت الفطريات التي تم عزلها بالطريقة التقليدية وتم ايجاد العدد الكلي للعزلات والانواع الفطرية المعزولة ،كما تم اختبار الفعالية الانزيمية للكشف عن الفطريات المحللة لمكونات المخطوطات وتمثلت بانزيم السيلوليز والبروتيز و الأميليز واللايبيز.
وشخصت جزيئيا بطريقة PCR وتمثلت بسبعة فطريات تسجل لأول مرة في العراق عامة وعلى المخطوطات خاصة وهي Alternaria atra , Aspergillus ustus, Cladosporium Chaetomium globosum, exasperatum Microdochium nivale , , Penicillium – 1
tardochrysogenum , tardochrysogenum Penicillium 2- وسجلت في البنك الجيني العالمي Genbankوحملت أرقام التسلسلات accession numbers MK503427 و MK503428و MK504425و MK504424و MK503439و MK504426و MK504427 .
حسبت النسبة المئوية للترددFrequency % والنسبة المئوية للظهور Occurrence % ومعامل كثافة التوزيع DII Distribution Intensity Index للفطريات المسجلة في البنك الجيني واجريت عليها التجارب الخاصة باستعمال المواد النانوية ( الفضة النانوية والزنك النانوي ).
درست الخصائص المظهرية للمستعمرات الفطرية النامية على الوسط الزرعي بعد المعاملة بالمواد النانوية ومقارنتها بمعاملة السيطرة ، كما درست اشكال النموات المجهرية تحت المجهر المركب من خلال تحضير شرائح مجهرية لكل المعاملات المدروسة . تمت معالجة المخطوطات المتضررة بالفطريات بتلك المادتين النانويتين ضمن العجينة المعدة لغرض ترميم وصيانة المخطوطات.
اظهرت النتائج وجود 557 عزلة فطرية ، واعطت بداية المخطوطة أعلى نسبة للأعداد الفطرية239 بنسبة 43.76% . سجلت نتائج الاختبارات الانزيمية للفطريات السبعة المسجلة أن الفطرين Alternaria atra و Aspergillus ustusسجلا اعلى فعالية لأنزيم السليلوليز بدلالة معدل قطر الهالة المتكونة 47.44 و 47.00 ملم واللذان لم يختلفا معنويا فيما بينهما ، وتفوق الفطر Microdochium nivale بالفعالية الانزيمية لأنزيم البروتيز63.78 ملم بدلالة معدل قطر الهالة والذي لم يختلف معنويا عن كل من الفطرين Aspergillus ustus و Chaetomium globosum ،واظهر انزيم الاميليز فعالية عالية للفطر Microdochium nivale بمعدل قطر هالة 60.22 ملم والذي لم يختلف معنويا عن الفطر Aspergillus ustus بمعدل قطر للهالة 59.33ملم ، اما الفطر Chaetomium globosum اعطى اعلى فعالية لأنزيم اللايبيز 68.56 ملم بدلالة معدل قطر الهالة المتكونة والذي لم يختلف معنويا عن الفطر Microdochium nivale بمعدل قطر للهالة 63.22 ملم .
اظهر الفطر Aspergillus ustus اعلى نسبة مئوية للظهور 11.6% واعلى نسبة مئوية للتردد 14.93% واعلى كثافة توزيع 44.82% في حين سجل الفطر Chaetomium globosum أقل نسبة مئوية للظهور والتردد وكثافة التوزيع %7.0 و12.47 %و24.71 % على التوالي .
بينت النتائج الجزيئية للفطريات المسجلة في البنك الجيني العالمي ومن خلال الشجرة الوراثية ونتائج التماثل بان العزلة العراقية للفطر Aspergillus ustus شبيهه 100%مع العزلات المصرية والبرازيلية والصينية والامريكية والهولندية ، وأن العزلة العراقية للفطر Cladosporium Exasperatum تشبه 100 % العزلات الهندية والكينية ، في حين تظهر العزلتان العراقيتان للفطرين1,2 Penicillium tardochrysogenum تشابها 100% مع العزلات العالمية الاسبانية والهندية وشمال افريقيا والصينية والسلوفاكية .
سجلت جميع الفطريات السبعة المسجلة في البنك الجيني العالمي تأثيرا بالمادة النانوية المتمثلة بالفضة النانوية والزنك النانوي وكان هذا التأثير واضحا على معدل قطر المستعمرة وشكل النمو الظاهري الذي يتجه نحو قلة قطر المستعمرة مع ارتفاع ظاهر في مكان اللقاحة الفطرية مع زيادة تركيز المركب النانوي ، وحقق الفطران Alternaria atra و 1-Penicillium tardochrysogenum اعلى نسبة للتثبط المتمثل بمعدل قطر المستعمرة الفطرية 10ملم عند المعاملة بالزنك النانوي بالتركيز 25ملغم /لتر من الوسط الزرعي PDA واللذان لم يختلفا معنويا عن كل من Microdochium nivale و Penicillium tardochrysogenum 2-. اظهر الفطران Alternaria atra و Penicillium tardochrysogenum 2- اعلى نسبة للتثبط المتمثل بمعدل قطر المستعمرة الفطرية 13.33ملم عند المعاملة بالفضة النانوية بالتركيز 25ملغم /لتر من الوسط الزرعي PDA. اظهرت الفحوصات المجهرية للغزول الفطرية تأثرها بالمركبات النانوية مع زيادة تركيز المادة النانوية وكان هذا التأثير يتراوح بين التحطيم الكامل للغزل الفطري وانفجاره وخاصة في التراكيز العالية من المادة النانوية وبين تجمع بروتوبلازم الخلية الفطرية وخاصة في التراكيز المتوسطة من المادة النانوية ، أو انحراف في مجرى جريان الفطر ومحاولته الابتعاد عن المادة السامة بالتكتل في مكان معين من الحيز المجهري تحت الفحص وخاصة في التراكيز الواطئة ، فضلا عن اختزال الكونيديات أو صغر حجمها او تشوهها تبعا لنوع الفطر وتركيز المادة النانوية ونوعها .كما تبين اختبارات زرع العينات المأخوذة من المخطوطات القديمة بعد معالجتها بالمادة الترميم بوجود التركيز العالي 25ملغم لكل لتر لكل من الزنك النانوي الفضة النانوية كل على حدة باختزال عدد الفطريات مقارنة بالمخطوطة قبل الترميم .