دراسة فعالية المشتت الحيوي السطحي المستخلص من بكتريا .Bifidobacterium spp في تثبيط الغشاء الحيوي للمسببات المرضية المعزولة من مرضى القسطرة القلبية وتأثيرهُ في عملية البلعمة

بتول شاكر عبد المجلاوي قسم علوم الحياة

الخلاصة
أًجريت هذه الدراسة لأجل تقييم تأثير المشتت الحيوي السطحي Biosurfactant المستخلص من بكتريا spp Bifidobacterium في تثبيط الغشاء الحيوي Biofilm للمسببات المرضية المعزولة من المرضى المراجعين لوحدة قسطرة القلب والشرايين ، تضمنت الدراسة الحصول على 89 من المرضى المراجعين لوحدة قسطرة القلب والشرايين في مستشفى الإمام الحسين (ع ) التعليمي ومن كلا الجنسين وبأعمار مختلفة تراوحت مابين (29 – 75) سنة للمدة من كانون الثاني 2014 – لغاية تموز 2014 .
تم زرع العينات المأخوذة من مرضى تصلب الشرايين ولكل انواع القسطرة القلبية وبثلاثة اختبارات وهي المسحات ، زرع طرف القسطار وزرع عينة الدم قبل إجراء القسطرة وبعدها لغرض عزل المسببات المرضية المكونة للغشاء الحيوي لمرضى لتصلب الشرايين . أظهرت نتائج الدراسة الحالية ان مرضى القسطرة القلبية التشخيصية بواقع 66(74.16%) مريض أعطى 15(60%)،15(60%) و 14(58.33%) و15(62.5%) نمواً جرثومياً على التوالي . اما مرضى القسطرة القلبية العلاجية المتمثلة 15(16.85%) مريض أعطى 6(24%) ،6(24%) و6(25%) و 6(25%) نمواً جرثومياً على التوالي ، وكان مرضى القسطرة القلبية التشخيصية والعلاجية معاً 8(8.99%) مريض أعطى 4(16%) ،4(16%) و4(14.67%) و3(12.5%) نمواً جرثومياً على التوالي .
وبينت النتائج قيم الحساسية والنوعية لأختبار المسحات 96% و 100% أما إختبار زرع طرف القسطار 96% و 100% على التوالي وإختبار زرع الدم فكانت 100 و 98% على التوالي، أتضح من النتائج بعد زرع العينات على الأوساط الصلبة اﻹغنائية والتفريقية إن 89 مريض (عينة مختلطة) أعطت 25(28.08%) عينة موجبة للزرع الجرثومي ، وإثنان منها أظهرت نوعين من الجراثيم فكانت 27(30.33%) عزلة جرثومية ، شخصت العزلات الجرثومية فكانت 11(70.74%) عزلة موجبة لصبغة غرام و 15(55.56%) عزلة سالبة لصبغة غرام وعزلة واحدة فقط من الخمائر 1(3.70%) وإن 64(71.91%) لم تعطي أي نمو .
أًختبرت قابلية العزلات المرضية على إنتاج الغشاء الحيوي Biofilm وبأستعمال ثلاثة طرائق مختلفة وهي طريقة الانبوبة (TM ) Tube method واكار أحمر الكونغو ((C.R.A Cong Red Agar وصفائح المعايرة الدقيقة Microtiter Plate (MTP) فقد أعطت 25(92.6%) و 16(59.26%) و26(96.29%) عزلة منتجة للغشاء الحيوي وبكميات مختلفة على التوالي .أظهرت نتائج التحري عن تكوين الغشاء الحيوي إن إختبار MTP له قيم حساسية 100% ونوعية 96% أما إختبار TM كانت الحساسية 96% والنوعية 100% وإختبار CRA فله قيم حساسية 61.5% ونوعية 100% .
وفي هذه الدراسة تم جمع 115 عينة من منتجات الألبان المحلية والمستوردة 45 (39.13%) عينة وحليب الأم 32(27.83%) عينة وحليب الأبقار 38(33.04%) عينة ،ٳذ تم الحصول على 22 عينة موجبة لبكتريا spp Bifidobacterium بعد تشخيصها بالفحوصات المظهرية و المجهرية والكيموحيوية ومقارنتها بالعزلة القياسية .
تم إجراء إختبار إنتشار الزيوتOil Spreding Techingue للتحري عن قابلية Bifidobacterium على انتاج المشتت السطحي الحيوي Biosurfactant ، ودُرس إختبار الكفاءة التضادية للمزرعة السائلة لبكتريا spp Bifidobacterium ضد بكتريا الاختبار Staphylococus aureus و Staphylococcus epidermidis و Pseudomonas aeruginosa وEscherichia coli و pneumoniae Klebsiella و Serratia marcescens بتكوين مناطق تثبيط حول الحفر بمعدل أقطار تراوحت بين (24 , 25 , 21 , 24 , 22 , 23 ) ملم على التوالي .
دُرست الفعالية التثبيطية للراشح ضد بكترياStaphylococus aureus وStaphylococcus epidermidis و Escherichia coli و Klebsiella pneumoniae و Proteus mirabilis و Pseudomonas aeruginosa و Enterobacter cloacae و Serratia mercescens , حيث بلغ أكبر معدل قطر التثبيط 32 ملم لبكتريا E.coli وأقل معدل قطر التثبيط 24 ملم لبكتريا P.aeruginosa مقارنة بالاجناس الاخرى .
وشملت الدراسة تأثير ثلاثة تراكيزمختلفة من المشتت الحيوي السطحي ضد مجموعة بكتريا الاختباروكانت معدلات أقطار مناطق التثبيط للتركيز 50 ملغم /مل كالاتي (33 , 34 , 30 , 34 , 32 , 30 , 33 ,32) ملم على التوالي . أما معدلات أقطار مناطق التثبيط للتركيز 25ملغم /مل فكانت كالأتي (30 , 32 , 27 , 32 , 31 , 28 , 31.5 , 29) ملم على التوالي، ومعدلات اقطار مناطق التثبيط للتركيز 12.5 ملغم /مل كالاتي (28 , 29 , 24 , 30 , 26 , 26 ,28 , 26) ملم على التوالي ،فقد تبين من التحليل الاحصائي وجود فروق دالة أحصائيا عند مستوى معنوية 0.01 P<في معدلات التثبيط تبعا للتركيز المستخدم وفروق دالة أحصائيا بين انواع البكتريا في مدى تأثرها بالمشتت الحيوي السطحي.

كذلك تم تحديد قيم (MIC ) Minimum Inhibitory Concentraction و (SubMIC) Sub Minimum Inhibitory Concentraction وMBC) ) Minimum Bactericidal Concentraction ،حيث بلغت قيمة MIC 6.25 ملغم/مل وSub MIC 3.12 ملغم/ مل و MBC 12.5ملغم/مل لبكتريا E.coli و K. pneumoniae و Enterobacter cloacae ، و بلغت قيمة MIC 12.5 ملغم/مل و Sub MIC 6.25 ملغم/مل و MBC 25 ملغم/مل لبكتريا S.aureus و S.epidermidis و P. mirabilisو P. aeruginosa و Serratia mercescens .
وتم دراسة قابلية المشتت الحيوي السطحي على تثبيط الغشاء الحيوي لبكتريا الاختبار بطريقة MTP واظهرت النتائج انخفاضاً ملحوظاً في تكوين الغشاء الحيوي بعد اضافة المشتت الحيوي السطحي مقارنة بتكوين الغشاء الحيوي قبل اضافة المشتت حيث بلغت نسبة الانخفاض 96.19% .
وكذلك اجري اختبار تأثير المشتت الحيوي السطحي على كفاءة عملية البلعمة خارج الجسم الحي فقد بلغت النسبة المئوية للبلعمة 40.9% لمجموعة السيطرة و64.8% للمجموعة التجريبية .
ومن ذلك نستنج أن المشتت الحيوي السطحي له فعالية تثبيطية واضحة ضد المسببات المرضية المعزولة من مرضى القسطرة القلبية وتثبيط الغشاء الحيوي للممرضات وكذلك رفع كفاءة عملية البلعمة خارج الجسم الحي .