دراسة التأثير الوقائي للمستخلص الكحولي والنانوي لبذور نبات الخرفيش Silybum marianum على بعض المعايير الفسلجية والنسجية والوراثية في ذكور الجرذان المستحث بها سرطان الكبد

كرار حسين حنيت الكريطي قسم علوم الحياة

الخلاصة

تهدفت الدراسة الحالية إلى معرفة التأثير الوقائي للمستخلص الكحولي والنانوي المخلق من اوكسيد الزنك لبذور نبات الخرفيش Silybum marianum للحد من تأثير سرطان الكبد المستحث بمادة الثيواسيتامايد thioacetamide(TAA) ورابع كلوريد الكاربون tetrachloride(CCl4) carbon في ذكور الجرذان البيضrattus Rattusعن طريق دراسة بعض التغييرات في المعايير الفسلجية و النسجية والوراثية. اجريت الدراسة في البيت الحيواني التابع لكلية التربية للعلوم الصرفة –جامعة كربلاء للمدة من 1/3/ 2022 ولغاية 1/7/ 2022, شملت 35 من ذكور الجرذ الأبيض ذات اوزان (200-250) غرام وكانت اعمارها (10-12) أسبوع ، قسمت إلى سبع مجاميع بواقع 5حيوانات لكل مجموعة وعدت المجموعة الاولى G1 مجموعة سيطرة سالبة جرعت بمحلول الملح الفسلجي لمدة 14 أسبوع ، والمجموعة الثانية G2 جرعت بالمستخلص الكحولي لبذور النبات بتركيز 100mg/kg لمدة 14 أسبوع ، وعدت المجموعة الثالثة G3 سيطرة موجبة حقنت بالبريتون بمادة thioacetamide بجرعة 200mg/kg يومياً لمدة أسبوعين ومن ثم حقنت بمادة رابع كلوريد الكاربون بجرعة 3mg/kg مرة واحدة في الأسبوع ولمدة 12 أسبوع ، والمجموعة الرابعة G4 جرعت بالمستخلص الكحولي بجرعة 100 mg/kg لمدة اسبوعين بعدها تعطى المزيج الثيواسيتامايد و رابع كلوريد الكاربون بحقنها حتى نهاية التجربة وهي 14 أسبوع، أما المجموعة الخامسة G5 والسادسة G6 والسابعة G7 جرعت بالمستخلص النانوي بجرعات (20,32,60 mg/kg) على التوالي لمدة أسبوعين ومن ثم تحقن بمزيج الثيواسيتامايد و رابع كلوريد الكاربون حتى نهاية التجربة وهي 14 أسبوع . جمعت عينات الدم والأنسجة بعد التضحية بالحيوانات عند نهاية التجربة لقياس المعايير التالية : قياس مستوى انزيمات الكبد Alanine transaminase(ALT) و Aspartate transaminase (AST) و Alkaline phosphatase (ALP) وتقدير مستوى البروتين الكلي (Total protein) و الالبومين (Albumin) والكلوبيولين (Globulin) والمالون الديهايد (malondialdehyde) والكلوتاثيون (Glutathione) والسوبر اوكسيد الدسميوتاز (Superoxide dismutase) وكذلك تقييم التغيرات المرضية لنسيج الكبد مع قياس اقطار كل من الخلايا الكبدية Hepatocytes والجيبانيات Sinusoids والوريد المركزي Central vein و قياس النسبة المئوية لتحطم الحامض النووي DNA وقد حصلنا على النتائج التالية :
1- كشفت الدراسة وجود 12 مركب فعال موجود في المستخلص الكحولي لبذور نبات الخرفيش عن طريق استخدام تقنية GC-Mass و كان المركب الفعال Phenol, 2,2′-methylenebis[6-(1,1-dimethylethyl)-4-methyl- يمتلك اعلى مساحة في المستخلص ، أما المركب الفعال Hexadecen-1-ol,trans-9- كان يمتلك أقل مساحة في المستخلص.
2- وجود ارتفاع معنوي (p≤0.05) في مستوى انزيمات الكبد AST,ALT,ALP والمالونالديهايد في مجموعة السيطرة الموجبة G3 مقارنة مع مجموعة السيطرة السالبة G1 في حين لا توجد فروق معنوية (p≥0.05) بين G1 وG2، بينما كان هنالك انخفاض معنوي (p≤0.05) في مستوى انزيمات الكبد AST,ALT,ALP في ذكور الجرذان في المجموعة G4 التي جرعت بالمستخلص الكحولي لبذور نبات الخرفيش وكذلك في المجاميع G7,G6,G5 التي جرعت بالمستخلص النانوي، وكذلك وجود انخفاض معنوي (p≤0.05) في مستوى البروتين الكلي والالبومين والكلوبيولين والكوتاثيون والسوبر اوكسيد دسيموتاز في مجموعة السيطرة الموجبة G3 مقارنة مع مجموعة السيطرة السالبة G1 في حين لا توجد فروق معنوية(p≥0.05) بين G1 وG2 ماعدا مستوى الكلوتاثيون كان هنالك فرق معنوي (p≤0.05) بين G1وG2، بينما كان هنالك ارتفاع معنوي (p≤0.05) في مستوى البروتين الكلي والالبومين والكلوبيولين والكوتاثيون والسوبر اوكسيد دسيموتاز في ذكور الجرذان في المجموعة G4 التي جرعت بالمستخلص الكحولي لنبات الخرفيش وكذلك في المجاميع G7,G6,G5 التي جرعت بالمستخلص النانوي للنبات .
3- وجود تغيرات في نسيج الكبد لمجموعة السيطرة الموجبة G3 مقارنة بمجموعة السيطرة السالبة G1 والمجموعة G2 وتشملت وجود خلايا ورمية ونخر في خلايا الكبد مع وجود نزف في النسيج وعدم انتظام الجيبانيات وكذلك عدم انتظام لشكل الفصيص الكبدي مع وجود التهاب في بعض مناطق النسيج، أما المجموعة G4 يظهر النسيج تحلل في بعض الخلايا الكبدية ووجود تنخر في الخلايا أخرى مع عدم انتظام الجيبانيات أما المجاميع G7,G6,G5 التي جرعت بالمستخلص النانوي أظهرت تغيرات نسجية بسيطة مقارنة بمجموعة السيطرة الموجبة تمثلت بتحلل في بعض خلايا الكبد في G5 والتهاب خفيف في G6 ، واظهرت المقاطع النسجية انتظام في الجيبانيات وشكل النسيج كان طبيعياً، وكذلك وجود ارتفاع معنوي (p≤0.05) في اقطار خلايا الكبد والجيبانيات والوريد المركزي في مجموعة السيطرة الموجبة G3 مقارنة مع مجموعة السيطرة السالبة G1 في حين لا توجد فروق معنوية (p≥0.05) بين G1 وG2، بينما كان هنالك انخفاض معنوي (p≤0.05) في اقطار خلايا الكبد والوريد المركزي في ذكور الجرذان في المجموعة G4 التي جرعت بالمستخلص الكحولي لنبات الخرفيش وكذلك كان هنالك انخفاض معنوي (p≤0.05) في اقطار خلايا الكبد والجيبانيات والوريد المركزي في ذكور الجرذان في المجاميع G7,G6,G5 التي جرعت بالمستخلص النانوي .
4- وجود ارتفاع معنوي (p≤0.05) في نسبة تحطم DNA في مجموعة السيطرة الموجبة G3 مقارنة مع مجموعة السيطرة السالبة G1 في حين لا توجد فروق معنوية (p≥0.05) بين G1 وG2، بينما كان هنالك انخفاض معنوي (p≤0.05) في نسبة تحطم DNA في ذكور الجرذان في المجموعة G4 التي جرعت بالمستخلص الكحولي لبذور نبات الخرفيش وكذلك في المجاميع G7,G6,G5 التي جرعت بالمستخلص النانوي مقارنة بمجموعة السيطرة الموجبة G3 .
نستنتج مما تقدم إن استحثاث سرطان الكبد في ذكور الجرذان البيض عن طريق حقنها تحت البريتون بمادة TAA وCCl4 يؤدي الى حدوث تغيرات في بعض المعايير الفسلجية والنسجية والوراثية عند تجريع الحيوانات فموياً بالمستخلص الكحولي والنانوي لبذور نبات الخرفيش كان له تأثيراً وقائياً ضد الإصابة بسرطان الكبد والمستخلص النانوي ذو فعالية وقائية أعلى من المستخلص الكحولي لبذور النبات وخصوصاً عند الجرعة (32mg/kg).