تقييم فاعلية بعض الرواشح الفطرية العادية والنانوية ضد الفطرالأسود Rhizopus stolonifer خارج الجسم الحي

نبأ محمد عبيس قسم علوم الحياة

الخلاصة

أجريت الدراسة في مختبرالدراسات العليا بكلية التربية للعلوم الصرفة في جامعة كربلاء خلال الفترة من 15/11/2021 لغاية 15/8/2022. بهدف السيطرة على الفطر المسبب لمرض العفن الأسود بإستخدام ظاهرة التضاد الفطري مع الفطريات المعزولة من قشع sputum بعض الأشخاص الذين تعافوا من الإصابة بكوفيد 19. مع أمكانية تحويل الفضة والزنك من الحالة المعدنية الى حالة نانوية باستخدام تلك الرواشح الفطرية .
تضمنت الدراسة تشخيص أربع عشرة فطرا معزولا من قشع أشخاص تعافوا من الإصابة بكوفيد 19 تشخيصا تقليديا ،ُ ثم شخصت جزيئيا بإستخدام تقنية تفاعل البلمرة المتسلسل ( PCR ) بالإعتماد على بواديء ( Primers ) خاصة بالتشخيص الجزيئي .
تم تسجيل الفطريات بالبنك الجيني العالمي Genbank وتعد هذه الدراسة كأول دراسة تعنى بهذا العمل على مستوى العراق والمنطقة . وهذه الفطريات هي Rhizopus americanus ورقمه التسلسلي ON981106 والفطر Rhizopus stolonifer ورقمه التسلسلي ON981097 والفطر Aspergillus brasiliensis ورقمه التسلسلي ON981104 والفطر Aspergillus costaricensis ورقمه التسلسلي ON981102 والفطر Aspergillus flavus ورقمه التسلسلي ON981297 والفطر Aspergillus minisclerotigenes ورقمه التسلسلي ON981101 والفطر Aspergillus niger 1ورقمه التسلسلي ON981098 والفطرAspergillus niger2 ورقمه التسلسلي ON981107 والفطر Aspergillus niger3 ورقمهالتسلسلي ON981105 والفطر Aspergillus oryzae ورقمه التسلسلي ON981295 والفطر Aspergillus piperis ورقمه التسلسلي ON981103 والفطر Aspergillus tubingensis1 رقمه التسلسلي ON981101 والفطر Aspergillus tubingensis2 رقمه التسلسلي ON981296والفطر Aspergillus welwitschiae رقمه التسلسلي ON981099 .
أظهرت النتائج التقارب والتشابه بين الفطريات المسجلة مع العزلات العالمية . وتم التركيز على ظاهرة التضاد الفطري للفطريات المعزولة من البلغم، فضلا عن بعض الفطريات الجلدية التي تم الحصول عليها من تجارب سابقة .
بينت نتائج التضاد الفطري حصول تباين في القدرة التضادية للفطريات المستخدمة في الدراسة مع فطر R. stolonifer ، أذ بلغت 3 حسب مقياس Bell بعد زراعتها على الوسط الزرعي سايبرويد دكستروز أكار(SDA) بدرجة حرارة 28 0 م لمدة خمسة أيام . ومن ثم تنقيتها وتحويلها إلى رواشح فطرية .
أوضحت النتائج وجود فروقات معنوية عند مستوى أحتمالية 0.05 لنوع مستخلص الفطر وتركيزه إذ لوحظ تذبذب تأثيرالرواشح الفطرية لكن بصورة عامة جميعها قد ثبطت نمو الفطر R. stolonifer مقارنة بمعاملة السيطرة التي أعطت معدل نمو قطري للفطر 8.0 سم بعد خمسة ايام من الحضن بدرجة حرارة 28 0 م . أظهر الراشح الفطري بالتركيز75% تفوقا في تأثيره التثبيطي على التراكيزالاخرى 100%,%50, 25 % قي نمو R. stolonifer. وبفروقات معنوية عند مستوى أحتمالية 0.05 ، إذ أعطى معدل نمو الفطر 2.571 سم وبنسبة تثبيطية 68% مقارنة ببقية التراكيز100%, %50 ,25% التي أعطت معدل نمو للفطر على التوالي 3.119, 6.143, 3.619 سم وبنسب تثبيطية 61%,23%,55%.
خضعت جميع الرواشح النانوية بعد استخدام الرواشح الفطرية في تحويل الفضة والزنك المعدني الى نانوي إلى الأختبارات وكان أول نقطة تحول إلى راشح نانوي هو الدالة اللونية وأختلاف في لون الراشح النانوي عن الراشح العادي قبل المعاملة بأوكسيد الزنك أو نترات الفضة ومن ثم إجريت الفحوصات الأخرى المتعلقة بتأكيد الحصول على المادة النانوية منها فحص الأشعة فوق البنفسجية والأشعة تحت الحمراء.
أوضحت النتائج وجود فروقات معنوية عند مستوى أحتمالية 0.05 لنوع راشح الفطرالنانوي بالزنك وتركيزه والتداخلات الثنائية في معدل قطر مستعمرة الفطر R. stolonifer. إذ أظهرت النتائج تذبذب في تأثير الرواشح ، ولكن بصورة عامة جميع الرواشح الفطرية ثبطت نمو الفطر R. stolonifer . أما تركيز الراشح الفطري بالزنك النانوي فقد أظهر التركيز 25% تفوقا على التراكيز 50% ، 75% , 100% في تأثيره التثبيطي في نمو الفطر R. stolonifer وبفروقات معنوية عند مستوى 0.05 ، إذ أعطى معدل نمو الفطر 0.738 سم وبنسبة تثبيطية 91% مقارنة ببقية التراكيز50 %،75% ، 100% التي أعطت معدل نمو للفطر 1.310، 1.857 ، 1.833سم على التوالي وبنسب تثبيطية مقدارها 84% , 77%, 77% . أما معاملة السيطرة فقد أعطت معدل نمو قطري للفطر 8.0 سم . كذلك أظهرت النتائج هناك فروقات معنوية عند مستوى أحتمالية 0.05 لنوع راشح الفطرالنانوي بالفضة وتركيزه ، اذ أظهرت النتائج تذبذبا في تأثير الرواشح لكن بصورة عامة جميعها ثبطت نمو الفطرR. stolonifer . من حيث تركيز الراشح الفطري النانوي أظهر التركيز 50% تفوقا على التراكيز 25%,75%,100% في تأثيره التثبيطي على نمو R. stolonifer وبفروقات معنوية عند مستوى أحتمالية 0.05 ، أذ أعطى معدل نمو الفطر 2.405 سم وبنسبة تثبيطية 70% مقارنة ببقية التراكيز التي أعطت معدل نمو8 ,2.714, 5 سم على التوالي وبنسب تثبيط صفر ,66% ,38% على التوالي , مقارنة معاملة السيطرة التي أعطت معدل نمو قطري 8.0 سم .
أجريت العديد من الفحوصات المجهرية على فطرRhizopusR. stolonifer المعامل بالرواشح الفطرية والمحاليل النانوية وأوضحت تأثير المعاملات المختلفة وتباين هذا التأثير بين تحلل أو تشوهات في الغزل الفطري وتجزء البروتوبلازم وتكتله في مناطق أخرى فضلا عن التشوهات في الحوافظ البوغية وأختلاف أحجامها ونضجها.