دراسة مقارنة للفعالية التثبيطية لمستخلصات بعض النباتات وتقييم المستخلصات النانوية لنبات إكليل الجبل Rosemary officinalis والخميرة saccharomyces boulardii ضد الفطر Fusarium equiseti المنتج لسم الفيومونايزين

هديل أموري عبدعلي العامري قسم علوم الحياة

الخلاصة

هدفت الدراسة إلى التشخيص الدقيق للفطريات المنتجة لسم الفيومونايزين Fumonisins من حبوب (الذرة الصفراء .Zea mays L، الحنطةTriticum spelta ) وإمكانية تصنيع جسيمات نانوية من أوراق نبات اكليل الجبل Rosemary officinalis والخميرةSaccharomyces boulardii لمكافحة الإصابة بالفطر Fusarium equiseti المنتجة لسم الفيومونايزين على حبوب الذرة الصفراء Zea mays L . .
أظهرت نتائج العزل والتشخيص إصابة حبوب الذرة الصفراءZea mays L. ، الحنطةTriticum spelta بالعديد من الفطريات و من ضمنها الفطر Fusarium spp فقد بلغ مجموع عدد العزلات التي تم الحصول عليها من20عينة حبوب الذرة الصفراء Zea mays L، الحنطةTriticum spelta من الأسواق المحلية في محافظة كربلاء للفطرspp. Fusarium هي 48) ،(25عزلة على التوالي بنسبة ظهور (70،50)على التوالي وبنسبة تردد (15.48،11.62) %على التوالي .
بينت نتائج التحليل الكيميائي للكشف عن سم الفيومونايزين باستعمال تقنية الكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداءHigh Performance Liquid Chromatography(HPLC) أنّ جميع أنواع الفطر Fusarium التي تم اختبارها لإنتاج السم على وسط الرز Rice Dextrose Agar كانت قادرة على إنتاج السم وبنسبة 100 % حيث ان النوع Fusarium equiseti أعلى انتاجًا للسم وبتركيز 190.8 ppm وعند زمن احتجاز 5.89 دقيقة ، بينما النوع Fusarium acutatum أقل العزلات انتاجًا للسم بتركيز 46.3 ppm وعند زمن احتجاز 5.80 دقيقة .
بينت نتائج التشخيص الجزيئي لسبعة عزلات منتخبة من الفطر Fusarium عن طريق تحليل التتابع النيوكلوتيدي ومقارنتها باستخدام برنامج BLAST)) أن جميع العزلات كانت ذات اختلافات وراثية مع العزلات التابعة لهذه الأنواع والمسجلة في المركز الدولي لمعلومات التقانات الحيوية (NCBI , National Center for Biotechnology Information) ( Fusarium solani ، Fusarium fujikuroi، Fusarium proliferatum ،Fusarium subglutinans ،Fusarium equisetai ، Fusarium verticillioides ، Fusarium acutatum .
قد بينت أن السلالات الخمسة التي تم الحصول عليها في هذه الدراسة سُجلت لأول مرة في العراق من خلال وجود طفرات في بعض القواعد النيتروجينية.
سجلت الأنواع المشخصة أعلاه في ((NCBI تحت أرقام انضمام تعريفية هي OP056029) , OP056030, OP056031, OP056032, OP056033, OP056034 و (OP056035على التوالي .
كشفت نتائج فحص المستخلص الكحولي الإيثانولي 96 % لأوراق النباتات المدروسة) إكليل الجبل , Rosemary officinalisالسبحبح Melia azedarzch ,النيم Azadirachta indica والمورينكاMoringa oleifera ) بتقنية Gas Chromatograohy Mass Spectrometry (GC-MS) عن ظهورخمسة عشر مركب فعال في مستخلـــص إكليل الجبــــــل Rosemary officinalis إذ سجلت المركبـات الفعالــة 4,6-Bis(1,1′-dimethylethyl)-2′,5′-dimethoxy-1,1′-biphenyl-2-ol ، Caryophyllene ، Eucalypto كأعلى نسب تواجد ضمن المواد الفعالة
و بنسب 28.38) ، 13.82 ، 12.46) % على التوالي ، في حين سجل مستخلص أوراق السبحبح Melia azedarzch تواجد عشرون مركب فعال ظهر فيها المركب Diethyl Phthalate أعلى نسبة تواجد 44.71 % ويليه المركب Oleic Acid وبنسبة تواجد 12.88%، سجل مستخلص أوراق نبات النيم Azadirachta indica تواجد خمسة وعشرون مركبًا فعالا سجل (R)-(+)-Limonene أعلى نسبة تواجد 15.63 وسجل المركب Neantine diethyl benzene-1,2-dicarboxylate نسبة 12.87 % و مستخلص أوراق المورينكا Moringa oleifera تواجد خمسة وثلاثون مركبًا فعالا ظهر فيها المركب Vitamin E أعلى نسبة تواجد بنسبة 13.89 % و gamma.-Sitosterol بنسبة 7.46 % .
بينت نتائج اختبار فاعلية المستخلصات الكحولية لأوراق النباتات المدروسة ( إكليل الجبل , R. officinalisالسبحبح M. azedarzch ,النيم A. indica والمورينكا M. oleifera ) قدرة المستخلصات في تثبيط نمو الفطـرequiseti Fusarium المنتج لسم الفيومونايزين Fumonisinوبنسب تثبيط متفاوتة عند استعمال التراكيز5,3,1)) غرام/لتر على التوالي ، إذ سجل التركيز 5 غم /لتر أعلى نسب تثبيط نمو الفطر في جميع المستخلصات، إذ ثبط مستخلص أوراق إكليل الجبل R. officinalis الفطر equiseti F. بنسبة 27.7 % ومستخلص أوراق السبحبح M. azedarzch ثبط نمو الفطر بنسبة 17.7 % بينما سجل مستخلص أوراق المورينكا M. oleifera 13.3% في حين سجل مستخلص اوراق نبات النيم A. indica نسبة تثبيط 14.4 % .
أثبتت الدراسة إمكانية تصنيع جسيمات الفضة النانوية من مستخلص أوراق نبات إكليل الجبل R. officinalis أذ ظهرت نتائج الفحص والتأكيد على تكون الفضة النانوية بامتلاكها شكلا بيضويا متطاولاً عند فحصها في المجهر الإلكتروني الماسح وتظهر بحجم 31.93 نانومتر عند فحصها في مجهر القوة الذرية وذات حجم بلوري 16.6 نانومتر عند فحصها في طيف حيود الأشعة السينية أظهرت نتائج فحص طيف حيود الأشعة السينية ظهور أربعة قمم حيود واضحة عند قيم (2θ) values هي : (38.8 , ,44.6 , 64.6 (77.2 والتي كانت تقابل (111 , 200 ، 220 , (311 وعلى التوالي من المخطط القياسي (Standard) لحيود طيف الأشعة السينية X-Ray Diffraction لجسيمات الفضة النانوية .
أظهرت هذه الدراسة إمكانية تصنيع جسيمات الفضة النانوية من محلول عالق الخميرة Saccharomyces boulardii إذ ظهرت نتائج الفحص والتأكيد على تكون الفضة النانوية بامتلاكها شكلاً شبه كروي عند فحصها في المجهر الإلكتروني الماسح و ظهرت بحجم 49.61 نانومتر عند فحصها في مجهر القوة الذرية وذات حجم بلوري 14.25 نانومتر عند فحصها في طيف حيود الأشعة السينية كما أظهرت نتائج فحص طيف حيود الأشعة السينية ظهور أربعة قمم حيود واضحة عند قيم (2θ) values هي: (,38.6 ,44.2 64.2 77.3 , (والتي كانت تقابل (111 , 200 , 220 , (311 وعلى التوالي من المخطط القياسي (Standard ) لحيود طيف الأشعة السينيةRayDiffraction X- لجسيمات الفضة النانوية.
كشفت أيضا نتائج استعمال الجسيمات النانوية المصنعة من مستخلص أوراق نبات إكليل الجبل R. officinalis وجسيمات الفضة النانوية المصنعة من الخميرة S.boulardii بتراكيز (50،75،100) ppm ضد الفطــــر F. equiseti المنتج لسم الفيومونايزين كفاءة عالية في نسب تثبيط نمو الفطر في جميع التراكيز إذ وصلت نسبة التثبيط التام (100)% عند التركيز (100) ppm.