الخلاصة
أجريت الدراسة الحالية في قسم المختبرات السريريه / كلية العلوم الطبية التطبيقية / جامعة كربلاء خلال الفترة من يناير 2021 إلى أكتوبر 2021 ، هدفت الدراسة إلى إلقاء الضوء على العلاقة بين تباين جين ZEB2 و مستوى بعض السيتوكينات (TNF-α، TGF-β، INF-) المشاركة في تمايز الخلايا المناعية في السكان العراقيين.
تم اخذ 80 متطوعًا سليمًا ، تم اختيارهم عشوائيًا ، في هذه الدراسة ، تتراوح أعمارهم بين 20-50 عامًا في وقت التحقيق. تم اختيار المتطوعين بعد التأكد من خلوهم من الأمراض والالتهابات التي تساهم في فشل جهاز المناعة في أداء عمله بكفاءة. تم جمع عينات الدم من المتطوعين في مستشفى الامام الصادق في مدينة بابل العراقية ، وتم التوقيع على الموافقة الأخلاقية من قبل كل متطوع.
كانت الدراسة عبارة عن دراسة وراثية سكانية أجريت على عينات مجموعة واحدة. تم التحقيق في تباين جين ZEB2 بواسطة طريقة التسلسل Sanger. تم قياس مستويات المصل من TNF-α و TGF-β و INF-γ و CRP ، وكذلك تم إجراء اختبار تعداد الدم الكامل (CBC).
أظهر التحليل الجيني لنتائج 80 عينة أن 34 عينة كانت متطابقة مع تسلسل الجين المرجعي دون اكتشاف أي اختلاف. بينما أظهرت 46 عينة المتبقية اختلافات متنوعه في الجين ZEB2. اذ اظهرت 23 من أصل 46 عينة اختلافا فرديًا في تسلسلها الجيني ، وأظهرت سبع عينات اختلافات مزدوجة في تسلسلها الجيني ، بينما اظهرت 16 عينة اختلافات متعددة في التسلسل الجيني .
تم تقسيم المتغيرات المكتشفة إلى مجموعتين ، متغيرات مسجلة مسبقًا (8 متغيرات) ومتغيرات جديدة غير مسجلة (9 متغيرات). تم اكتشاف المتغيرات المسجلة مسبقًا (144520205 A / – ، 144520203 A / – ، 144520054 A / T ، 144520071 T / G ، 144520024 T / – ، 144520056 A / C ، 144520120 C / A) في 19 عينة ، تم اكتشاف7 من أصل 8 متغيرات في منطقة 5`UTR ، بينما تم الكشف عن البقية في منطقة Exon1. المتغيرات الجديدة غير المسجلة (144519937 T / A ، 144520162 T / A ، 144520053 G / A ، 144520208 A / – ، 144519954 A / T ، 144520101 A / G ، 144519939 G / A ، 144520099 G / T ، 144520163 G / T) في 27 عينة ، 5 من 9 تم اكتشافها في منطقة Exon1 ، بينما تم الكشف عن 4 الباقية في منطقة 5`UTR.
يتم التحقيق في تأثيرات الاختلافات الجينية ZEB2 على عوامل الدراسة (IFN-γ و TNF-α و TGF-و Neutrophils و Lymphocytes و WBC و MXD) من خلال مقارنة مستوى أو مقدار كل عامل في العينات التي تشترك في نفس الاختلاف. يتم ذلك عن طريق تصنيف نتائج كل عامل إلى ثلاث فئات ، قيم حد عالية ، وقيم متوسطة ، وقيم حد منخفضة ، ومقارنة هذه القيم على قيم p.
وفقًا لنتائج TGF-، شارك 11 فردًا متغيرًا 144520053 G / A ، وأظهر 9/11 (81.8٪) أفرادًا قيمًا حدودية عالية ، وأظهر 2/11 (18.2٪) قيمة متوسطة ، ولم يظهر أي فرد قيمة حد منخفضة. يوضح التحليل الإحصائي فرقًا كبيرًا في نتائج مشاركة العينات في هذا المتغير مع قيمة p = 0.035 (p≤0.05). تم الكشف عن اختلافات كبيرة أيضًا في نتائج معلمة IFN-في العينات التي تشارك 144520162 متغيرات T / A بقيمة p = 0.022 (p≤ 0.05) ، شارك 15 فردًا هذا المتغير ، وأظهر 3/15 (20٪) حدًا مرتفعًا أظهرت القيم 10/15 (66.66٪) متوسط القيم والباقي 2/15 (13.33٪) أظهرت قيم حد منخفضة. فيما يتعلق بـ TNF-α ، شارك 12 فردًا متغير 144519937 T / A ، أظهر 10/12 (83.33٪) قيمًا حدودية عالية ، بينما أظهر الباقي 2/12 (16.66٪) قيمًا متوسطة.
يعرض التحليل الإحصائي فروقًا ذات دلالة إحصائية في نتائج مشاركة العينات مع قيمة p = 0.021 (p≤0.05). شارك 11 فردًا أيضًا متغير 144520053 G / A ، أظهروا جميعًا قيمًا حدودية عالية لـ TNF-α. شارك 15 شخصًا آخرين 144520162 متغيرًا وأظهروا جميعًا قيمًا حدودية عالية لـ TNF-α. لم يتم الكشف عن قيمة P بسبب القيم الصفرية. من خلال تحليل نتائج مستويات العدلات ، شارك 11 فردًا متغيرًا 144520053 G / A ، وأظهر 10/11 (90.9٪) قيمًا متوسطة ، بينما أظهر الباقي 1/11 (9.1٪) قيمة حدية منخفضة. أشار التحليل الإحصائي إلى وجود فروق ذات دلالة إحصائية بين العينات التي تشارك هذا المتغير مع قيمة p = 0.007 (p≤0.01). أظهر التحليل الإحصائي للعوامل الأخرى (MXD و WBC و Lymphocyte) فرقًا غير مهم بين العينات التي تشارك المتغيرات الجديدة المكتشفة في هذه الدراسة.
أظهرت النتائج أيضًا أن الأشخاص ذوي المتغيرات المزدوجة والمتعددة لديهم قيم TGF-أعلى من أولئك الذين لديهم متغيرات مفردة أو المجموعات الغير حاويه على متغيرات (متطابقة). بالنسبة لقيم INF-، كانت أعلى قيمة في المتطوعين الذين لديهم متغيرات فردية ومزدوجة. أظهرت نتائج TNF-α أن المتطوعين الذين لديهم متغيرات متعددة لديهم قيم أعلى من أولئك الذين لديهم متغيرات فردية أو مزدوجة ، وهذا يشير إلى أنه كلما زادت المتغيرات الجينية ، زادت قيم TNF-α.