الخلاصة
تهدف هذه الدراسة معرفة الدور الوقائي للمستخلص المائي لنبات الاندروجرافس Andrographis paniculata على بعض المعايير الفسلجية والنسجية والجزيئية في ذكور الارانب البيض المعاملة بمادة البوتيل هيدروكسي تولوين Butylated hydroxyltoluene (BHT) .
اجريت الدراسة في في كلية التربية للعلوم الصرفة / جامعة كربلاء والبيت الحيواني التابع الى كلية الطب البيطري / جامعة كربلاء للمدة من بداية شهر تشرين الثاني 2021 ولغاية شهر شباط 2022 تضمنت هذه الدراسة استخدام 100 ارنب من ذكور الارانب البيض Oryctolagus cuniculus التي تراوحت اعمارها بين 8-9 اشهر ومعدل اوزانها مابين 1500-2000 غرام ، تم تحضير المستخلص المائي لنبات الاندروجرافس ، بعدها تم اجراء التجربة الاولى التي هدفت تحديد الجرعة المؤثرة النصفية (ED50) للمستخلص المائي لنبات الاندروجرافس من خلال دراسة منحني الجرعة المؤثرة ، فقد تم استخدام 60 من ذكور الأرانب البالغة والتي قسمت عشوائيا الى ستة مجاميع متساوية ( 10 حيوان / مجموعة) وجرعت فمويا خمس جرع متزايدة من المستخلص المائي لنبات الاندروجرافس يوميا (0،50 ،100 ، 150، 200 و 250 ملغم/كغم) ولمدة اربعة اسابيع ، جمعت عينات الدم بعد نهاية التجربة لدراسة المعايير التالية : تركيز المالونالديهايد ((MDA والكلوتاثيون المختزل ((GSH والكولسترول الكلي ((TC وتركيزالشحوم البروتينية عالية الكثافة (HDL) وكانت الجرعة المؤثرة النصفية للمستخلص تساوي ( 100 ملغم /كغم / و.ج).
تضمنت التجربة الثانية التي صممت لبيان الدور الوقائي للمستخلص المائي لنبات الاندروجرافس على التأثيرات السمية المستحثة بمادة البوتيل هيدروكسي تولوين BHT استخدام 40 من ذكور الأرانب البالغة والتي قسمت عشوائيا الى اربعة مجاميع متساوية (10 حيوان / مجموعة) ، جرعت المجموعة الاولى(G1) 1مل/ كغم من زيت الذرة وعدت كمجموعة سيطرة ،وجرعت المجموعة الثانية 1 (G2) ملغم /كغم من BHT ، جرعت المجموعة الثالثة (G3) ب 100 ملغم /كغم من المستخلص المائي لنبات الاندروجرافس ، في حين جرعت حيوانات المجموعة الرابعة G4)) 1 ملغم /كغم من BHT و 100 ملغم /كغم من المستخلص المائي لنبات الاندروجرافس ولمدة شهر يوميا .
جمعت عينات الدم بعد تجويع الحيوانات Fasting blood sample بعد نهاية التجربة لدراسة المعايير التالية : تركيز انزيم ناقلة الاسبارتات (AST) Aspartate transaminase و الانزيم الناقل للامين Alanine transaminase (ALT) و انزيم الفوسفاتيز القاعدي Alkaline phosphatase (ALP) و انزيم سوبر أكسيد ديسميوتاز Superoxide dismutase (SOD)و المالونالديهايد Malondialdehyde (MDA) و الكلوتاثيون المختزل Reduced Glutathion (GSH) و الشحوم البروتينية عالية الكثافة High Density Lipoprotein (HDL) و الشحوم البروتينية منخفضة الكثافة Low Density Lipoprotein (LDL) و الشحوم البروتينية منخفضة الكثافة جدا Very Low Density Lipoprotein (VLDL) و الدهون الثلاثية Triacylglycerol (TAG) و البيليروبن الكلي Total Bilirubin (T-BIL) و الالبومين Albumin ، اليوريا Urea و حامض اليوريك Uric acid و عامل التنخر الورمي نوع الفا Tumor necrosis factor (TNF-α) و الانترلوكين Interleukin 6 (IL-6) والسيتوكروم Cytochrome P450 ، اضافة الى قياس التعبير الجيني لجين CD44 باستخدام تقنية Real – Time PCR .
اظهرت نتائج هذه التجربة ان التجريع الفموي ب BHT أدى الى حدوث ارتفاع معنوي (P<0.01) في معدل تركيز AST و ALPو ALT و MDA و TC و LDLو T-BIL و Urea و Uric acid و TNF-α و IL-6 و انخفاض معنوي (P<0.01) في معدل تركيز Albumin و SOD و GSH و HDL و Cytochrome P450 وعدم وجود فروق معنوية (0.01<P) في معدل تركيز TAG وVLDL مقارنة مع مجموعة السيطرة .
فيما اظهرت المجموعة المعاملة ب ED50 للمستخلص المائي لنبات الاندروجرافس حدوث ارتفاع معنوي (P<0.01) في تركيز HDL و Albumin و GSH وانخفاض معنوي (P<0.01) في تركيز TAG و LDL و VLDL و MDA و T-BIL و Urea وعدم وجود فرق معنوي (0.01<P) في معدل تركيز AST و ALPوALT و TC و Uric acid و SOD و TNF-α و IL-6 و Cytochrome P450 مقارنة مع مجموعة السيطرة .
كما بينت التجربة ان التجريع الفموي ب BHT مع التجريع الفموي بال ED50 من المستخلص المائي لنبات الاندروجرافس ادى الى حدوث ارتفاع معنوي في GSH وعدم وجود فروق معنوية (0.01<P) في معدل تركيز ALP و AST و ALT و TC وTAG و HDL و LDL و VLDLو MDA وSOD ،T-BIL و Albumin و Urea و Uric acid و TNF-α و IL-6 و Cytochrome P450مقارنة مع مجموعة السيطرة .
اظهرت نتائج الفحص الجزيئي لجين CD44 وجود ارتفاع معنوي في تعبير الجين في المجموعة المعاملة بمادة BHT عند المقارنة بمجموعة السيطرة في حين لوحظ عدم وجود فرق معنوي في تعبير الجين بالمجموعة المعاملة بالمستخلص المائي لنبات الاندروجرافس وBHT عند المقارنة بمجموعة السيطرة .
اظهرت نتائج الفحص النسجي ان التجريع الفموي ب BHT ولمدة شهر ادى الى حدوث تغيرات تنكسيه واضحة في نسيج الكبد مع احتقان في الوريد المركزي وارتشاح الخلايا الالتهابية حوله اضافة الى تغلظ وانحلال لانوية الخلايا الكبدية وتفجي واضح مع وجود تحلل مائي في الخلايا الكبدية مقارنة مع مجموعة السيطرة ، اما في نسيج الكلية فقد ادت المعاملة بمادة BHT الى حدوث احتقان وضمور وانكماش في الكبيبة البولية اضافة الى وجود زيادة في فسحة بومان وتحطم النبيبات البولية مع انسلاخ البطانة الداخلية للنبيبات البولية ،كما ادت الى حدوث تغيرات تنكسية في نسيج الطحال مع وجود احتقان و زيادة في اللب الاحمر Red pulp على حساب اللب الابيض White pulp مقارنة مع مجموعة السيطرة.
يستنتج من الدراسة الحالية ان مادة البوتيل هيدروكسي تولوين ( BHT)تسببت بتاثيرات مرضية واضحة على الكبد ،الكلى والطحال وتؤكد ان المعاملة بالجرعة المؤثرة النصفية للمستخلص المائي لنبات الاندروجرافس (100 ملغم /كغم) لها دور وقائي ضد التلف الحاصل بفعل مادة BHT في ذكور الارانب البيض .