الخلاصة
هدفت هذه الدراسة الى عزل وتشخيص الفطريات المنتجة للسموم الفطرية من بعض المواد الغذائية في محافظة كربلاء .أجريت الدراسة في مختبرات كلية التربية للعلوم الصرفة للعام الدراسي 2021 – 2022 لغرض تقييم فعالية المستخلصات المائية والكحولية لنبات القرنفل ودراسة تاثير منظمي النمو النباتية Giberellic acid و Indol aacetic acid واجراء توليفة بين المستخلصات النباتية ومنظمات النمو على الفطريات المنتجة لسم الافلاتوكسين .
بينت نتائج عزل وتنقية الفطريات المرافقة للمواد الغذائية المكسرات و البقوليات واللحوم والالبان والخضروات والفواكه والاندومي والاجباس والبسكت والشعرية ومعجون الطماطة والسمسم والرز والمعكرونة والدخن والخبز التي عزلت من بعض المواد الغذائية المتداولة في الأسواق المحلية في مدينة كربلاء انها كانت ملوثة بالفطريات وان جميع الفطريات التي عزلت كانت منتجة لسم الافلاتوكسين اذ تم الاستدلال على ذلك باستخدام وسط جوز الهند مع محلول الامونيا .
شخصت الفطريات تشخيصا مظهريا و تشخيصا جزيئيا وذلك باستخدام تقنية Polymerase chain Reaction ( PCR) والتي نجحت في مضاعفة NS8 و NS1 مع البادئات (ITS) وقد تم استخدام نفس البادئات في تحديد تتابع القواعد النايتروجينية العائدة لrRNA التابعة للمركز الدولي لمعلومات التقانات Genbank National Center of Biotechnology Information ( NCBI) وقد تم إيداعها في قاعدة بيانات ( الفطريات الاحيائية).
وان الفطريات التي تم عزلها هي Penicillium oxalicum , Penicillium expansum , Aspergillus flavus , Cladosporium Uredinicola , Aspergillus sydowii , Aspergillus Oryzae , Aspergillus Tamarii , Aspergillus nomius , Alternaria triticina , Penicillium griseofulvum , Aspergillus austwicki , Aspergillus flavus , Cladosporium cladosporioides, Penicillium brevicompatum , Fusarium proleferatum , Aspergillus caespitosus , Aspergillus versicolor .وقد تم تسجيل جميع هذه العزلات بالبنك الجيني العالمي وقد أعطت لها ارقام تسلسلية .MT03303 ,AF033479 ,MZ35787 JN088229 , LC094427 , MH66405 , MT25485, MK45036 , JX418360 , MF03465 , OM72177 , MW51015 , MF47593, MT55892 , HQ44324 , KU866669 , MK64522 , MT49745 على التوالي وقد بينت النتائج أن هناك تشابه بنسبة 99 – 100٪ بين هذه العزلات والعزلات العالمية.
حسبت النسبة المئوية لظهور الانوع الفطرية المنتجة للسموم في العينات التي تم دراستها وكانت نسبة ظهور للفطر Aspergillus هي 55.56 % اذ ظهر في عشر عزلات ، اما الفطر Penicillium فظهر في اربع عزلات وكانت نسبة ظهوره 22.22 % ، اما نسبة ظهور الفطر Cladosporium فكانت 11.11% فقد ظهر في عزلتين فقط ، اما جنس الفطر Alternaria وجنس الفطر Fusarium فكانت نسبة ظهور كل منهما 5.56 % اذ ظهر كل منهما في عزلة واحدة . اما النسبة المئوية للتردد فقد تردد الفطر Aspergillus flavus ثلاث مرات من عزلات مختلفة وهي التفاح و الباذنجان والكاجو وكانت نسبة تردده 16.67 % ، اما بقية الأنواع العائدة لاجناس الفطريات فتردد كل نوع في عزلة واحدة وكانت نسبة ترددها 5.56 % .
استخدم المستخلصات الكحولية والمائية بالتراكيز 20 , 15 , 10 . 5 , 2.5 ملغم \مل لتقييم فاعلية المستخلصات في تثبيط الفطريات المشمولة بالدراسة وحساب النسبة المئوية وتحديد قيمة التركيز المثبط الأدنى . بينت نتائج التحليل الاحصائي تفوق المستخلص الكحولي على المستخلص المائي لنبات القرنفل وازدياد النسبة المئوية للتثبيط مع زيادة التركيز .
بينت الدراسة تاثير منظمي النمو في نمو الفطريات المدروسة اذ ظهر انخفاضا معنويا في قطر المستعمرة عند التراكيز 20 , 15 , 10 , 5 , 2.5 ملغم \مل ، وتحديد قيمة التركيز المثبط الأدنى ، كما بينت نتائج التحليل الاحصائي تفوق منظم النمو الاندول استك اسد من حيث القابلية التثبيطية على الجبرلين وازدياد النسبة المئوية للتثبيط مع زيادة التركيز .
أوضحت النتائج عدم فعالية التوليفة بين المستخلص المائي لنبات القرنفل و منظمات النمو في تثبيط الفطريات المدروسة وذلك بخلط التركيز المثبط الأدنى للمستخلص المائي 17،18 ، 19 ،20 ملغم \مل مع قيمة التركيز المثبط الأدنى لمنظمات النمو الجبرلين 17 ، 18 ، 19 ملغم \مل والاندول استك اسد 12 ، 13 ، 14 فكانت ذات فاعلية اقل في تثبيط الفطريات المنتجة لسم الافلاتوكسين مما يدل على ان قدرة كل من المستخلص المائي ومنظمات النمو على تثبيط نمو الفطريات المنتجة للسموم تكون اعلى في حال استخدامها كلا على حده .
أوضحت النتائج فعالية التوليفة بين المستخلص الكحولي لنبات القرنفل ومنظمات النمو في تثبيط الفطريات المنتجة للسموم وذلك بخلط التركيز المثبط الأدنى للمستخلص الكحولي 0.5 ، 1 ، 1.5 ، 2 ملغم \مل مع قيمة التركيز المثبط الأدنى لمنظمات النموالجبرلين 17 ، 18 ، 19 ملغم \مل ، والاندول استك اسد 12، 13 ، 14 ملغم \مل فكانت النتيجة الحصول على توليفة لها فاعلية عالية في تثبيط الفطريات المنتجة لسم الافلاتوكسين وبتراكيز اقل .
أوضحت نتائج الكشف عن المواد الفعالة لنبات القرنفل وجود عدد من المركبات الكيميائية الفعالة حيث أظهرت النتائج باحتواء براعم ازهار نبات القرنفل على كل من الفلافونات والكلايكوسيدات والفينولات والتربينات والرانتجات والزيوت الطيارة والصابونيات والسترويدات والفلويدات .