الكشف عن الطفرات المحتملة لجينات ACCase و ALS المقاومة

ايمان حامد كاظم الزويني قسم المحاصيل الحقلية

الخلاصة
ُنفذت تجربتان حقليتان في احد حقول قضاء الهندية- محافظة كربلاء المقدسة اثناء الموسم الز ارعي الشتوي 2022-2021 بهدف د ارسة الطف ارت المحتملة المقاومة لفعل بعض مبيدات ادغال جنس Lolium. صممت التجربة الأولى وفق تصميم القطاعات الكاملة المعشاة (R.C.B.D) بترتيب اللواح المنشقة وبثلاثة مكر ارت, اذ تضمنت اللواح الرئيسة (حنيطة و رويطة) 4 اربعة انواع من المبيدات هي Chevalier و Pallas و Tobik و Axial مع معاملة مقارنة (الرش بالماء فقط), بينما تضمنت اللواح الثانوية ز ارعة بذور ادغال جنس Lolium مجموعة من ثلاث محافظات ع ارقية هي محافظة كربلاء المقدسة و محافظة بابل ومحافظة واسط. اما التجربة الثانية فقد نفذت حسب تصميم القطاعات الكاملة المعشاة بعامل واحد وبثلاثة مك ار ارت, اذ تضمن العامل رش 11 توليفة ما بين مبيدات Chevalier و Pallas و Tobic و Axial فضلاً على الرش بالماء فقط . تم ز ارعة بذور الحنطة صنف اللطيفية وتم اجرى العدوى الصطناعية بإضافة بذور أدغال جنس Lolium . وتم قياس بعض صفات النمو والحاصل ومكوناته للحنطة والكشف عن جينات ALS وACCase وتحليلها كما وسجلت القياسات للادغال بمرحلتين بعد 60 و90 يوماً من الرش بالمبيدات
المذكورة اعلاه.
اظهرت نتائج الد ارسة ما يأتي :
1- تم الكشف عن عدد من الطف ارت المقاومة لفعل المبيدين Tobik و Axial في جين ACCase في تتابعات mRNA لنباتات محافظة كربلاء المقدسة وواسط وبابل والتي هي مشابهة للطفرة الموجودة في النباتات المقاومة المسجلة عالميا, وذلك باستبدال قواعد نتروجينية بأخرى في الكودونات 25 و 29 و 33 و167 و 209 من CGA و GAA و AAT و TTG
GCA و CCA الى الكودونات Threonine و Leucine و Asparagine و Glucine و Arginine وCATوATG وATA التي تشفر للاحماض المينية Proline وAlanine و Histidine و Methionine وisoleucine , تطابقت هذه الطف ارت في الدغال الع ارقية مع الطف ارت المسجلة عالميا, كذلك اوضحت النتائج وجود طفرة مغلطة في الكودون161 لتتابع نباتات واسط و كربلاء المقدسة المقاومة لفعل المبيد, وذلك باستبدال قاعدتين نتروجينيتين من الكودون AAG والتي تشفر الى Lysine الى AGA التي تشفر الى Arginine. كذلك لوحظ وجود طفرتين من نوع Frame shift mutation في النباتات المقاومة لفعل المبيد
لمحافظتي كربلاء المقدسة وواسط ,تطابقت هذا النتائج في نباتات الحنيطة مع الرويطة . 2- تم الكشف عن عدد من الطف ارت في جين Acetolactate Synthase( ALS ) في تتابعات mRNA
لنباتات محافظة كربلاء المقدسة وواسط وبابل المقاومة لفعل المبيدين Chevalier و Pallas, وذلك باستبدال قواعد نتروجينية بأخرى في الكودونات 195 و200 من AGC وAGT التي تشفر للحامض الاميني Serine الى ACC وGGT التي تشفر للحامضين الامينيين Theonine وGlycine , تطابقت هذه الطفرات في الادغال العراقية مع الطفرات المسجلة عالميا, كذلك تم الكشف عن وجود طفرتين مغلطة في الكودونات 175 و266 لتتابع نباتات محافظة واسط, وذلك باستبدال الكودونات GTC وCGC التي تشفر للاحماض الامينية Valine وArginine بالكودونات GGC وTGC والتي تشفر للاحماض الامينية Glycine وCysteine بالتتابع , تطابقت نتائج هذا الجين في ادغال الرويطة (Lolium temulentum) مع ادغال الحنيطة )Lolium rigidum), ما عدا وجود طفرة صامتة واحدة في الكودون رقم 150 GCT الذي يشفر للحامض الاميني Alanine الذي تغيرت الى الكودون GCC الذي يشفر لنفس الحامض الاميني في ادغال
محافظة واسط .
3-تفوق رش مبيد الـ Chevalier معنويا على المبيدات الخرى (Pallas و Tobic و Axial) في تقليل صفات ادغال Lolium كارتفاع النبات و دليل الكلوروفيل و كثافة الدغال و الوزن الجاف وتفوق النسبة المئوية للمكافحة و النسبة
4- وجود اختلاف معنوي بين بذور محافظة كربلاء المقدسة وبابل و واسط في معظم الصفات قيد الد ارسة من ارتفاع ادغال Lolium, دليل الكلوروفيل, عدد التفرعات, الوزن الجاف لدغال Lolium بعد 60 و90 يوم من الرش.
5- إن المبيد Chevalier اعطى اعلى نسبة تثبيط للادغال المأخوذ بذورها من محافظة بابل, بلغت 5.72 % بينما اعطى المبيد Axial اقل نسبة تثبيط للأدغال المأخوذ بذورها من محافظة واسط بلغت 0.48 %بعد 90 يوم من الرش.
6- تفوقت التوليفة Chevalier + Pallas + Tobik +Axial في خفض معظم الصفات كأرتفاع النبات ودليل الكلورفيل وكثافة الدغال والوزن الجاف للادغال بعد 60 و90 يوماً من الرش , وتفوق الصفات ارتفاع النبات وكثافة النبات و دليل الكلورفيل وعدد الحبوب بالسنبلة ووزن 1000 حبة والحاصل البايولوجي وحاصل الحبوب لمحصول الحنطة 98.90 سم,308 نبات م-2, 30.33, 32.33, 30.79غم, 14.29
ميغا غ ارم هــ-1, 5.12 ميغا غ ارم هــ-1.
7- تفوقت التوليفة Chevalier + Pallas بإعطائها اعلى عدد اشطاء وعدد سنابل و وزن 1000 حبة والحاصل البايولوجي وحاصل حبوب لمحصول الحنطة 391سم و368.67 سنبلة م-2 و49.46 غم و17.55 ميغا غ ارم هـ-1 و 6.25 ميغا غ ارم هـ-1 على التوالي .
III