عزل وتشخيص الفطريات المرافقة لزراعة الفطر الغذائي الأبيض Agaricus bisporus وإمكانية مكافحتها

حنين محي سلمان الزيادي قسم وقاية النبات

الخلاصة

أُجريت هذه الدراسة في مختبرات وقاعات تنمية قسم وقاية النبات لكلية الزراعة – جامعة كربلاء في الموسم الزراعي 2021-2022 بهدف التحري عن أهم الممرضات والمنافسات الفطرية المرافقة لاستزراع الفطر الغذائي الابيض Agaricus bisporus في العراق وتشخيصها جزيئياً ودراسة تأثيراتها على الانتاج وإمكانية المكافحة باستخدام بعض المستخلصات النباتية (القرنفل والكونوكاربس والكركم والدارسين واليوكالبتوس والحبة السوداء) والمبيدات الزراعية (المبيد الاحيائي Verox والمبيد الكيميائي Benomyl والمبيد النباتي Tondixer والمستحضر الحيوي Seabloom) . وأظهرت نتائج العزل والتشخيص للفطريات المرافقة لحالات الاصابة في تربية الفطر الغذائيA. bisporus والتي جُمعت من محطات مختلفة لتربية الفطريات اللحمية من خمسة محافظات وهي بغداد ،الديوانية ، اربيل ، كركوك ، المثنى وجود أنواع مختلفة تعود إلى الأجناس الفطرية Aspergillus spp. وFusarium spp. و .Mucor spp و .Penicillium spp و . Verticillium sppو .Rhizopus spp و .Alternaria spp و .Trichoderma spp بينت نتائج اختبار مقدرتها التضادية ضد نمو الفطر A. bisporus مختبريا على وسط Compost agar medium (CAM) وجود بعض الفروق المعنوية بين مقدرة العزلات الفطرية المختبرة من حيث تأثيرها على النسبة المئوية لنمو الفطر الغذائي اذ سجل الفطر Trichoderma harzianum المعزول من محافظة اربيل اعلى نسبة مئوية للتثبيط بلغت 75% وسجل كلا من الفطرين Aspergillus flavus المعزول من محافظة بغداد والفطر Mucor circinelloides المعزول من محافظة اربيل نسبة تثبيط بلغت 66.66% وسجل الفطرين Aspergillus ochraceus المعزول من محافظة الديوانية والفطر citrinum Penicillium المعزول من محافظة بغداد نسبة تثبيط بلغت 58.33% بينما سجل الفطر Aspergillus terreus نسبة تثبيط بلغت 50% .
لقد شُخصت العزلات الفطرية المعزولة مظهريا استنادا للصفات المجهرية وتم التشخيص الجزيئي لستة عزلات فطرية اظهرت مقدرة تضادية كبيرة عن طريق تحليل تسلسل قواعد الحامض النووي للمنطقة الجينية ITS ومن خلال تسلسل القواعد النتروجينية لهذه العزلات وجد انها مختلفة وراثياً عن العزلات الاخرى المشخصة في المركز الوطني لمعلومات التقانة الحيوي (NCBI) ولذا تم تسجيلها تحت ارقام الادخال ON738705.1 وON738706.1 وON738707.1 وON738708.1 وON738710.1 و ON925001 للعـزلات (Aspergillus flavus و Aspergillus ochraceus و Aspergillus terreus و Mucor circinelloides وPenicillium citrinum و Trichoderma harzianum ) على التوالي ومقارنة كل عزلة بالعزلات المشخصة عالميا في بنك الجينات . وبينت التجارب المختبرية ان جميع المستخلصات النباتية المختبرة عملت على تثبيط نمو العزلات الفطرية الممرضة والفطر الغذائي بنسبة مختلفة ، حيث تميز مستخلصي القرنفل والكونوكاربس باعلى نسبة للتثبيط ، اذ سجل مستخلص القرنفل نسبة تثبيط وصلت الى 71.5% ، ومستخلص الكونوكارس وصل الى 68.4% .
بينما اظهرت كفاءة المبيدات الزراعية في تثبيط نمو العزلات الفطرية الاكثر ضراوة ، اذ سجل المبيد الاحيائي Verox اعلى معدل تثبيط للعزلات الفطرية الممرضة بنسبة 78.7% ، في حين بينت توليفة المبيد Veroxمع مستخلصي القرنفل والكونوكاربس أعلى معدل تثبيط بنسبة 77.9% مقارنة بمعاملة المقارنة 0.00% ،وسجلت نسبة تثبيط نمو الفطر الغذائي الابيض 38.1% مقارنة بمعاملة المقارنة 0.00% مختبريا .
اظهرت التجربة في قاعة التربية للتحري عن مدى تأثير المسببات المرضية (A.flavus -B1 و A.ochraceus-D1 و A.terreus-K1 و P.citrinum-B1 و T.harzianum-E1 و M.circinelloides-E1) على بعض معايير النمو للفطرالغذائي A. bisporus ، اذ سببت جميع المسببات المرضية المختبرة خفضاً معنوياً بعدد الاجسام الثمرية المتكونة ومعدل اوزانها وقطر القبعة وطول الساق ، وانعكس كذلك تاثير المسببات على المحتوى الغذائي للأجسام الثمرية من العناصر (النيتروجين و الفسفور والبوتاسيوم والصوديوم ) والبروتين الكلي .
أظهرت العوامل المستخدمة (مستخلص نبات القرنفل و مستخلص نبات الكونوكاربس والمبيد الاحيائي Verox ) والتوليفة فيما بينها كفاءة فاعلة في تثبيط تأثير المسببات المرضية وزيادة بعض معايير النمو للفطر الغذائي A. bisporus ، إذ اظهرت النتائج تفوق معاملة التوليفة بين المبيد الاحيائي Veroxمع مستخلصي القرنفل والكونوكاربس في تثبيط تأثير الفطريات المرضية ، إذ سجلت أعلى معدل في عدد الاجسام الثمرية بلغ 505 و 515 و 540 و 435 و 500 و 405 جسماً / م2 للفطريات (A.flavus-B1 و A.ochraceus-D1 و A.terreus-K1 و P.citrinum-B1 و T.harzianum-E1 و M.circinelloides-E1) قياساً بمعاملة المقارنة والتي اعطت ( 195 و 170 و 240 و 140 و 125 و 180 ) جسماً / م2 على التوالي للفطريات الانفه الذكر، في حين كانت عدد الأجسام الثمرية في معاملة السيطرة 580 جسماً / م2 و تلتها معاملة المستخلص النباتي للقرنفل بمعدل (350 و355 و410 و285 و330 و290) جسما / م2 ، ثم معاملة المستخلص النباتي الكونوكارس بمعدل (385 و360 و350 و330 و235 و295) جسماً/ م2 واخيراً المعاملة بالمبيد الحيوي Verox بمعدل (310 و 315 و355 و340 و240 و255) جسماً ثمريا / م2 على التوالي .
اثبت النتائج نفسها على كمية الحاصل ، فقد اظهرت النتائج تفوق معاملة التوليفة بين المبيد الاحيائي veroxمع مستخلصي القرنفل والكونوكاربس في زيادة كمية الحاصل النهائي ، إذ سجلت أعلى معدل (19.894 و 20.289 و21.603 و16.398 و19.118 و17.07) كغم/م2 مقارنة بمعدل معاملة المسبب المرضي (A.flavus-B1 ، A.ochraceus-D1 ، A.terreus-K1 ، P.citrinum-B1 ، T.harzianum-E1 ، M.circinelloides-E1) التي اعطت معدل(4.933 و 4.364 و6.495 و3.343 و2.603 و4.741) كغم/م2 في حين كانت كمية الحاصل النهائي في معاملة السيطرة 23.376 كغم/م2، وتلتها معاملة المستخلص النباتي للقرنفل بمعدل (11.414 و11.395 و13.655 و9.194 و11.389و9.775 ) كغم/م2 ، ثم معاملة المستخلص النباتي للكونوكارس بمعدل (13.951 و 12.546 و12.011 و 11.283 و 7.264 و 10.136) كغم /م2 واخيراً المعاملة بالمبيد الحيوي Verox بمعدل (11.105 و 11.453 و12.264 و 11.606 و 8.029 و8.576) كغم/م2 على التوالي.